Kapag ang mga cell na ating pinag-kultura

pabrika ng cellay kontaminado, karamihan sa kanila ay mahirap hawakan.Kung ang mga kontaminadong selula ay mahalaga at mahirap makuha muli, ang mga sumusunod na pamamaraan ay maaaring gamitin upang alisin ang mga ito.

1. Gumamit ng antibiotics

Ang mga antibiotic ay mas epektibo sa pagpatay ng bakterya sa loobmga pabrika ng cell.Ang kumbinasyong gamot ay mas mabisa kaysa gamot lamang.Ang pang-iwas na gamot ay mas epektibo kaysa sa gamot pagkatapos ng kontaminasyon.Ang pang-iwas na gamot ay karaniwang gumagamit ng double antibiotic (penicillin 100u/mL plus streptomycin 100μg/mL).Pagkatapos ng kontaminasyon, ang paraan ng paglilinis ay kailangang 5 hanggang 10 beses na mas malaki kaysa sa karaniwang halaga.Ang gamot ay dapat gamitin sa loob ng 24 hanggang 48 na oras pagkatapos ng karagdagan, at pagkatapos ay palitan ng karaniwang gawain.Ang likido ng kultura.Ang pamamaraang ito ay maaaring maging epektibo sa mga unang yugto ng kontaminasyon.Bilang karagdagan sa penicillin at streptomycin, ang mga antibiotic na ginamit ay maaari ding magsama ng gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracycline, nystatin, atbp. Ang karaniwang ginagamit ay 400 hanggang 800 μg/mL kanamycin o 200 μg/mL tetracycline.Ang medium ay pinapalitan tuwing 2 hanggang 3 araw at ipinapasa sa loob ng 1 hanggang 2 henerasyon para sa paggamot.Sa mga nagdaang taon, naiulat na ang 4-fluoro, 2-hydroxyquinoline (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilin derivative (Pleu-romutilin derivative, BM-Cyclin2: BM-1 at tetracycline derivative (BM-2)) Ang mga antibiotic ay epektibo sa pagpatay ng mycoplasma kapag ginamit nang nag-iisa o pinagsama.Ang tatlong antibiotic na ito ay inihanda lahat sa 250X na puro solusyon sa PBS at iniimbak sa -20°C para magamit sa ibang pagkakataon.Ang konsentrasyon ng paggamit ng Cip ay 10 μg/mL, ang BM-1 ay 10 μg/mL, at ang BM-2 ay 5μg/mL.Kapag ginagamit, i-aspirate muna ang kontaminadong culture medium, idagdag ang RPMI1640 culture medium na naglalaman ng BM-1, pagkatapos ay aspirate ang culture medium pagkatapos ng 3 araw, idagdag ang RPMI1640 culture medium na naglalaman ng BM-2, at kultura sa loob ng 4 na araw, at iba pa sa loob ng 3 magkakasunod na araw .rounds, hanggang sa mapatunayan ng 33258 fluorescent staining microscopy na ang mycoplasma ay naalis na, pagkatapos ay idinagdag ang normal na medium ng kultura para sa kultura at pagpasa ng 3-4 na beses.

2. Paggamot sa pag-init

Ang pag-incubate ng kontaminadong tissue culture sa 41°C sa loob ng 18 oras ay maaaring pumatay ng mycoplasma, ngunit may masamang epekto sa mga selula.Samakatuwid, ang isang paunang pagsusuri ay dapat na isagawa bago ang paggamot upang tuklasin ang oras ng pag-init na maaaring pumatay ng mycoplasma sa pinakamataas na lawak at may pinakamaliit na epekto sa mga selula.Ang pamamaraang ito ay minsan ay hindi mapagkakatiwalaan.Kung gagamutin muna ng mga gamot at pagkatapos ay pinainit sa 41°C, magiging mas mabuti ang epekto.

3. Gumamit ng mycoplasma-specific serum

Maaaring alisin ang kontaminasyon ng Mycoplasma gamit ang 5% rabbit mycoplasma immune serum (hemagglutination titer 1:320 o mas mataas).Dahil maaaring pigilan ng partikular na antibody ang paglaki ng mycoplasma, nagiging negatibo ito 11 araw pagkatapos ng paggamot sa antiserum at mananatiling negatibo pagkalipas ng 5 buwan.ay negatibo.Gayunpaman, ang pamamaraang ito ay mas mahirap at hindi kasing ginhawa at matipid tulad ng paggamit ng antibiotics.

4. Iba pang mga pamamaraan

Bilang karagdagan sa mga nabanggit na paraan ng pag-alis ng kontaminasyon, mayroon ding mga pamamaraan ng inoculation at isterilisasyon sa mga hayop, mga pamamaraan ng macrophage phagocytosis, mga paraan ng pagdaragdag ng bromouracil sa kontaminadongmga bote ng kulturaat pagkatapos ay i-irradiate ang mga ito ng liwanag, at mga paraan ng pagsasala, atbp., ngunit lahat sila ay mas nakakagulo at hindi epektibo.Samakatuwid, sa sandaling mangyari ang kontaminasyon ng mycoplasma, maliban kung ito ay may partikular na mahalagang halaga, ito ay karaniwang itinatapon at muling nililinang.

mangyaring makipag-ugnayan sa Whatsapp at Wechat: +86 180 8048 1709